红景天是蔷薇目景天科红景天属多年生草本野生植物。目前有关红景天的应用研究较为广泛，尤其是对于其苷类、多糖类提取成分的药理活性。现有研究逐步表明，红景天黄酮类化合物相较于其他成分，在某些药理活性上占有一定的优势[1]。黄酮类化合物作为红景天中具有药理活性的主要化学活性成分，是有效的抗氧化剂和金属螯合剂，并具有抗氧化和抗疲劳、调节血脂血糖、防治心脑血管疾病、保护细胞及肝脏、抗菌、抗病毒等多种药理活性[1-2]。

随着配位化学的不断发展，无机化学与有机化学之间建立了重要的桥梁，在药学领域逐渐散发出强大的潜力。近年来药物和化学的研究焦点锁定在了期望通过获得药物中活性成分的金属离子配合物以寻找高效、低毒的新型创新型药物。作为许多中草药的活性成分——黄酮类化合物自然成为了相关金属离子配合物的研究热点[3]。与黄酮配位的金属多集中在锌、铜、铝、锡、铬、锑等，尤其是人体所需的微量元素。

人体所必需的微量金属元素如锌、铁、锰等，在细胞和生理过程中起关键作用，包括催化、调节和信号传导作用，与人体的新陈代谢相关。其中，微量元素Mn是人体内多种酶的重要组成成分，具有多种药理作用，参与糖原异生、酶的激活、抗氧化应激、增强细胞免疫功能等生理活动[4]。

当黄酮类化合物与金属离子发生配位反应后，不仅能使二者原有的活性叠加，发挥药理作用，还可能产生原本不具备的新的药理活性。同时提高黄酮类配合物的稳定性和生物利用度[5-7]。

本实验以红景天黄酮为黄酮化合物的代表，利用紫外分光光度法研究了溶液的pH、红景天黄酮与金属的配比、温度等因素对于红景天黄酮与金属Mn2+配位反应的光谱影响[8-10]。

1 资料与方法

1.1仪器与试剂

样品来源：市售(北联药品总汇)。

T6新世纪紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；RE3000旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；202-1AB型电热恒温干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司)；HH-601超级恒温水浴(金坛市华峰仪器有限公司)；FA1104N分析天平；索氏提取器。

芦丁标准品(国药集团化学试剂有限公司，F)；乙醇(天津市永大化学试剂有限公司)；乙醚(天津市凯信化学工业有限公司)；石油醚(天津市大茂化学试剂厂)；硝酸铝(天津市大茂化学试剂厂)；亚硝酸钠(天津市大茂化学试剂厂)；盐酸(天津市凯信化学工业有限公司)；氢氧化钠(烟台市双双化工有限公司)；硫酸锰(中国化学试剂三厂天津)。以上试剂均为分析纯，实验用水为自制超纯水。

1.2红景天总黄酮提取及纯化

(1)总黄酮提取：样品粉碎过筛，烘干，用乙醚回流，乙醇提取、过滤、浓缩，即得到总黄酮提取液。用石油醚萃取，得到总黄酮沉淀并进行冷冻干燥，得红景天总黄酮粗提取物，备用。

(2)红景天黄酮纯化：取红景天黄酮粗提取物用30%乙醇溶解稀释，备用。准确称取预处理后的D101湿树脂于100 mL具塞磨口三角瓶中，加入总黄酮溶液，在温度为30 ℃、转速为100 r/min条件下振荡5 h。取吸附饱和的树脂，精密加入体积分数为95%的乙醇40 mL，在30 ℃、转速为100 r/min振荡5 h，待其充分解吸后，收集解吸液浓缩并冷冻干燥，得纯化的红景天总黄酮。

取经纯化的红景天黄酮约0.01 g，用30%乙醇稀释定容至100 mL，在200～400 nm波长范围内紫外扫描，确定最大吸收波长。

1.3红景天黄酮含量测定

1.3.1绘制标准曲线

取在105 ℃下干燥至恒重的芦丁标准品10 mg，加70%乙醇溶解定容至50 mL配成浓度为0.20 g/L的标准溶液。精确量取标准品溶液0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL，置于10 mL容量瓶中，加5%亚硝酸钠溶液0.3 mL，摇匀，静置6 min；加10%的硝酸铝0.3 mL，摇匀，静置6 min；加4%氢氧化钠4.0 mL，用70%乙醇定容至10 mL。静置12 min,在510 nm下测定吸光度，以吸光度A为纵坐标，芦丁浓度(g/L)为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程。

1.3.2总黄酮含量测定

取经纯化的总黄酮0.5g，加70%乙醇定容至100 mL作为黄酮试液。取黄酮试液0.5 mL于10 mL容量瓶中，加5%亚硝酸钠溶液0.3 mL，摇匀，静置6 min；再加入10%硝酸铝溶液0.3 mL，摇匀，静置6 min。最后加4%氢氧化钠溶液4.0 mL，用70%乙醇定容至10 mL，摇匀，静置12 min，在510 nm处测定吸光度，根据回归方程计算浓度及百分含量。

1.4红景天黄酮与Mn2+配位反应光谱动力学研究