3 结果与讨论

3.1 地肤子提取物对于α-葡萄糖苷酶所具有的抑制效应

从图1 中可看出，地肤子提取物对于α- 葡萄糖苷酶均具有抑制效应，三者在抑制α- 葡萄糖苷酶的活性方面从小到大依次为：石油醚相、乙酸乙酯相和正丁醇相。其中地肤子正丁醇相抑酶活性最高，IC 50 为1 339.65 mg/L， 明显高于阿卡波糖(IC 50=1 036.54 mg/L)。正丁醇相的质量浓度小于1.5 mg/mL 时, 呈现明显的剂量依赖性特征，且线性关系良好，即随着样品浓度的增加，其抑酶活性迅速增大。乙酸乙酯相的IC 50为743.54 μg/mL，抑酶活性略低于阿卡波糖。试验结果证实地肤子正丁醇相和乙酸乙酯相对的抑酶效应较为强大，而石油醚相抑酶活性明显偏低，药用开发价值不高。

图1 不同浓度下地肤子提取物对α-葡萄糖苷酶活性的对比

3.2 地肤子提取物的抑酶动力学研究

由于地肤子石油醚相抑酶活性较低，研究意义不大，故仅对乙酸乙酯相和正丁醇相进行α- 葡萄糖苷酶动力学抑制试验。利用Lineweave-Burk 双倒数作图法得到图2和图3。

图2 地肤子乙酸乙酯提取物的抑酶动力学曲线

图3 地肤子正丁醇提取物的抑酶动力学曲线

从图2 和图3 可以看出，不同质量浓度的地肤子提取物所得到的抑酶方程线性关系良好。由于地肤子正丁醇相和乙酸乙酯相的抑酶动力学直线没有通过原点，随着浓度的增加斜率变大，即随着样品浓度的增大反应速度 Vmax 减小。而三种不同浓度的抑酶动力学直线与X 轴几乎相交于一点，即米氏常数 Km 基本保持不变。以上结果表明，地肤子乙酸乙酯相、正丁醇相与α- 葡萄糖糖苷酶的结合位点不同于底物PNPG 的结合位点，证明二者对α- 葡萄糖苷酶的抑制效应为非竞争性抑制效应[16]。根据Lineweave-Burk 方程计算地肤子正丁醇相和乙酸乙酯相的Km 值分别为2.073 0 μg/mL 和 2.586 7 μg/mL。

4 结 论

本文以PNPG 为底物探讨地肤子提取物的抑酶活性，并分析了抑酶作用类型。结果显示地肤子正丁醇相有较高抗α- 葡萄糖苷酶活性，作用明显优于阿卡波糖，而乙酸乙酯相抑酶活性略弱于阿卡波糖，也具有较好的抗α- 葡萄糖苷酶活性。二者的抑酶类型均为非竞争型抑制效应。鉴于地肤子在我国资源较为丰富，本研究为其今后大规模开发利用地肤提供试验依据。后续拟对地肤子正丁醇相进行活性部位追踪，期待分离鉴定出活性高的抑酶单体成分。

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文章来源：《水动力学研究与进展》 网址: http://www.sdlxyjyjzzz.cn/qikandaodu/2021/0510/604.html

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